【文献分享】Sony SH800 助力揭示KRAS依赖的胰腺癌发展中的新靶点

内容摘要

图1. TAK1支持KRAS^G12D驱动的PDAC发展

研究人员首先通过免疫组化分析了173例人类PDAC样本中TAK1的表达情况，发现癌细胞中TAK1的表达和激活显著上调。随后，作者在18周龄的KRAS^G12D小鼠胰腺中观察到腺泡-导管化生（ADM）区域和PanIN-1、PanIN-2病变，而在KRAS^G12D TAK1^ΔAc小鼠中，这一过程被完全抑制，表明TAK1在ADM中发挥着关键作用。此外，通过3D胶原基质培养系统模拟体内ADM过程，发现KRAS^G12D表达的腺泡细胞能够高效地发生ADM并形成导管样结构，而TAK1缺失则阻止了这一过程。

图2. 转分化使腺泡细胞对凋亡和坏死性PCD敏感

为了探究TAK1在KRAS驱动的ADM和癌变过程中的分子机制，研究人员分析了小鼠胰腺蛋白提取物中与MAP激酶信号通路和增殖相关的通路激活情况。结果显示在18周龄KRAS^G12D小鼠中，AKT、ERK和MEK1/2的磷酸化水平增加，而TAK1的额外缺失则消除了这种增加。进一步的实验表明，TAK1缺失的KRAS^G12D表达细胞在TNF刺激下显示出CASPASE- 3裂解和MLKL磷酸化，这是凋亡和坏死的标志。

图3. TAK1抑制不会引起促炎免疫反应

研究人员从PDAC患者肿瘤组织中生成了包含肿瘤细胞和免疫细胞的肿瘤球体，并用TAK1抑制剂5Z-7-Oxozeaenol处理，以评估TAK1抑制对肿瘤细胞和免疫细胞的影响。通过Sony SH800流式细胞分选技术，研究人员分离出CD45+免疫细胞，并进行单细胞RNA测序（scRNA-Seq）。结果显示，TAK1抑制主要影响CD8+、CD3E+和CD44+ T细胞，且这些细胞表现出显著的转录组变化。

流式分选关键应用