NK细胞是先天免疫的重要组成部分，能抵御病毒感染和清除异常细胞。与T细胞和B细胞不同，NK细胞通过激活和抑制受体识别目标细胞。它们在癌症免疫治疗中备受关注，因为能自发清除转化细胞，且无引起移植物抗宿主病的allo反应性，是“现成”细胞疗法的理想选择。此外，NK细胞还可通过基因工程表达CAR，增强对恶性细胞的特异性。本文基于5激光147荧光通道的Sony ID7000TM超高维全光谱细胞分析仪开发了一个29色高维流式细胞术方案，用于深入分析人类外周血中的NK细胞表型，旨在为NK细胞疗法的临床前开发和监测提供工具。
Sony ID7000TM超高维全光谱细胞分析仪从3激光86荧光通道到7激光184荧光通道，配置灵活且强大，能够兼容所有市售荧光染料，具有强大的相似荧光染料解析能力，使得高维流式实验的染料选择更加灵活、且易于实现。本文作者是基于5激光147荧光通道的Sony ID7000TM仪器进行的方案开发、优化和数据采集。
表1. 5激光Sony ID7000TM仪器通道布局。
得益于Sony ID7000TM高密度无缝排布的超多高灵敏度、高稳定性PMT检测器配置，能够实现对荧光染料全光谱信号的无遗漏全真收集，最小化染料之间的相互干扰，最优化高维样本分析时不同亚群的准确识别，实现各功能分子表达微弱变化的捕捉。
表2. 29个优化的染料组合间相似性（均 ≤ 0.77）。
遵循抗原丰度和染料亮度强弱搭配原则，并充分考虑将相似性相对高的染料对分配给非共表达的Marker组合，实现最佳的分辨效果，并进行逐步测试优化调整后生成的29色高维方案如下：
NK细胞的高度异质性增加了评估NK细胞疗法产品质量的复杂性，因此需要改进评估工具和确定预测生物标志物，而基于Sony ID7000TM新开发的29色流式细胞术方案可全面表征NK细胞，快速评估产品特性与效力，改善患者治疗，并适用于NK产品临床前分析及癌症患者NK细胞诊断等多种应用。
图1. 代表性门控策略。A.从PBMC中识别出NK细胞。B. 基于成熟标记物的表达评估NK细胞的发育多样性。C-D. 新鲜分离的PBMC（灰色）和体外培养的NK细胞（蓝色）的差异：C. 评估NK细胞的激活水平和潜在的组织驻留特性；D. 基于检查点和抑制受体的表达评估NK细胞的功能障碍状态。E. 基于激活和共激活受体的表达评估NK细胞的细胞毒性潜能。
文章强调了NK细胞在免疫治疗中的潜力，尤其是在癌症治疗中。同时，它也指出了当前NK细胞疗法面临的挑战，如产品效力的评估和供体间的变异性。通过使用基于Sony ID7000TM超高维全光谱细胞分析仪开发的高维流式细胞术检测方案，研究人员希望能够更好地理解NK细胞的复杂性，并为开发更有效的NK细胞疗法提供支持。
Reference
OMIP-115: High-Dimensional Phenotypic Characterization of Human Natural Killer Cells for Therapeutic Use
https://doi.org/10.1002/cyto.a.24941
基于ID7000™的首个 42 参数人全血免疫表型分析高维方案（OMIP-112）
基于ID7000™的首个小鼠高维胞内方案（OMIP-111）
<svg viewbox="0 0 1 1" style="float: left;line-height: 0;width: 0px;box-sizing: border-box;"></svg>此 29 色方案聚焦于 NK 细胞相关的多种标志物，全面覆盖 NK 细胞亚群识别，以及成熟、记忆、激活、迁移和抑制等功能的全方位考察，堪称复杂度极高的高维深度检测方案。其中诸多分子，如各类共激活受体与免疫检查点分子，染色及检测难度极高。而 Sony ID7000™超高维全光谱细胞分析仪以实测数据彰显卓越灵敏度与超凡分辨能力，精准捕捉每一个微弱信号，清晰区分复杂细胞群体，轻松应对复杂检测挑战，全方位满足科学家对 NK 细胞深入探究的极致需求。其强大性能得益于硬件的坚实保障与软件的强大助力，二者协同发力，相得益彰，为高维 NK 细胞研究提供无与伦比的优质解决方案，引领流式细胞检测技术迈向新高度。
更详细的产品信息可参考：
https://www.sonybiotechnology.com
热线电话：400-619-7910
邮箱：fcm@sony.com.cn
