【文献分享】SONY MA900助力探究结核杆菌ESX-1介导小鼠肺部巨噬细胞累积

MTB可以募集异质性MNPs亚群

研究人员利用单细胞RNA测序探究MNPs在感染早期的分化性质。通过索尼MA900流式细胞仪高效去除NK细胞、T细胞和B细胞后，对剩余细胞进行单细胞RNA测序。分析结果显示成功鉴别多个异质性的MNPs，包括肺泡巨噬细胞（CD11c+SiglecF+, Chil3）、中性粒细胞（Ly6g+, S100a8hi）和单核细胞（Ly6chi, Cx3cr1+）。

图1 . MTB可以在小鼠肺部诱导募集异质性MNPs

ESX-1功能缺失导致单核来源巨噬细胞数量减少

敲除ESX-1的关键组分EccD1后，CD11c^hi-MNC、CD11c^lo-MNC和中性粒细胞数量均减少。感染H37RvΔEccD1的小鼠细胞数量大幅减少，其中51.8%为肺泡巨噬细胞，47.4%为单核细胞来源的巨噬细胞，表明ESX-1功能缺失导致单核细胞来源的巨噬细胞数量减少。

图2. SmartSeq2揭示了ESX-1在募集单核细胞来源的巨噬细胞不同亚群中的作用

MTB感染后MNPs转录差异性探究

与过渡单核细胞相比，单核细胞来源的巨噬细胞表现出氧化磷酸化和对干扰素反应的富集。此外，这些巨噬细胞中MHC II复合物和氧化磷酸化上调。与免疫逃逸相关的基因也表达上调。

图3. 在肺部MTB感染期间募集的MNPs包括具有抗炎特征的细胞亚群

MTB在其感染部位诱导巨噬细胞成熟

结合使用多重单分子荧光原位杂交和特定蛋白标记的空间转录组学技术，实现了亚细胞转录定位、细胞类型聚类及目标细胞的空间分析。研究发现，在距离MTB感染细胞100 µm内，42种基因表达上调。尤其是Hmox1、Nos2和Hif1α，MTB感染细胞附近单核细胞来源的巨噬细胞基因特征增加。

图4. MTB仅在其存在附近诱导巨噬细胞成熟

索尼流式在研究中的工作：