《中国药典》2020 年版三部“生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则”( 指导原则 9401) 是国内首个适用于生物制品生物活性/效价测定方法验证的指导原则，主要用于指导和规范新建活性/效价方法或因各种相关变更涉及活性/效价测定方法的改变时的验证工作。
在 ChP ＜9401＞ 中分别列举了体外法（细胞法）和体内法（动物法）各一例作为验证实例来演示验证设计、分析步骤和计算过程。需要说明的是，这些实例仅仅作为演示分析步骤和计算过程用，不同的测定方法可根据其具体特点选择与实例中不同的实验设计和制定不同的可接受标准。
我们以基于细胞的体外生物学活性测定法的验证为例，在 SoftMax Pro 7 版本软件中推演了验证的整个分析过程，软件的分析结果与实例展示的分析结果全部一致。在下文中，我们详细向您展示在软件中的推演过程和分析结果。
验证过程
ChP ＜9401＞中的体外细胞法实例，在验证中将相对准确度、精密度、线性及范围 4 个指标进行合并实验设计，同时考察不同时间、不同分析人员和细胞代次 3 个因素对实验结果的影响，每个因素两个变化水平，采用三因素两水平的全因子设计，共进行 8 轮试验。每轮试验中考察了在对数尺度上从 0. 5 至 2 呈均匀间隔的 5 个效价水平，每个效价水平在一块板内设置两个独立重复，以两个独立重复的几何均值出具一个报告值。如此每个效价水平在 8 轮实验中可获得 16 个测定值，8 个报告值，最终共获得 5 个效价水平的 80 个测定值，40 个报告值。而后用该 40 个报告值合并计算来评价准确度、精密度、线性和范围，其中准确度与线性又可通过线性回归来合并考察。
将 40 个报告值（几何均值）导入 SoftMax Pro 7 版本软件中，并设置 5 个效价水平。
相对准确度的验证
按照药典中相对准确度评价方法项下计算公式，在 SoftMax Pro 7 软件中计算每个效价水平相对效价测定值的相对偏倚及其置信区间。软件中的计算结果与药典实例中展示的计算结果完全一致。
中间精密度的验证
按照药典中中间精密度评价方法项下计算公式，在 SoftMax Pro 7 软件中计算每个效价水平相对效价测定值的几何标准偏差（GSD）、几何变异系数（GSV）及其置信上限。软件中的计算结果与药典实例中展示的计算结果完全一致。
线性验证
以效价理论值的对数(横坐标)对其相应的效价测定值的对数(纵坐标)作图，采用最小二乘法进行线性回归。在 SoftMax Pro 7 软件中直接进行线性回归拟合，软件的拟合结果与药典实例中展示的曲线拟合结果一致。
范围验证
该实例方法的检测范围是 64%-156%，涵盖产品质量标准范围 80%-150%，并且相对准确度、中间精密度和线性均符合要求。
经过上述验证，证明该分析模板是可靠的。我们将相对准确度、精密度、线性及范围 4 个指标的验证结果编辑到一个结果页。使用该分析模板时，可将本结果页的可接受标准修改成产品的实际可接受标准。
分析模板的使用方法：
打开或导入分析模板
使用 SoftMax Pro 7.0-7.0.3 GxP 版本软件的用户，在软件中打开并使用该分析模板；使用 SoftMax Pro 7.1 GxP 及以上版本软件的用户，先将分析模板导入数据库，再在软件中打开并使用该分析模板。
对分析模板中的报告值的排布区域、剂量水平变化和重复孔数进行相应的修改。
对“验证结果页”中的可接受标准进行相应的修改。
将报告值导入分析模板，软件会自动进行线性拟合、相对准确度和中间精密度的计算。该分析模板会自动呈现所有的分析结果。
若您需要上述指导原则 9401 的验证分析模板
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