细胞衰老是一种不可逆的细胞周期停滞状态，在组织修复、炎症和疾病过程中扮演着复杂的角色。在相关研究过程中，鉴定衰老细胞（SnCs, senescent cells）的标志物至关重要。然而，目前常用的衰老细胞检测标志物（如SA-β-gal、p16、p21等）在评估中存在显著的变异性，影响检测结果的准确和稳定。
为此，纽约大学的研究者们聚焦于细胞衰老过程中的细胞核变化，在进行DAPI染色后，统计了一系列表征核形态的参数，包括细胞核大小、圆度、DAPI染色强度以及高密度点数量等。基于这些参数，研究者们结合机器学习与细胞核形态计量学方法，开发出一种单细胞识别技术，构建了能够稳定、准确评估细胞衰老的系统工具——核形态计量学分析流程（Nuclear Morphometric Pipeline, NMP），并分别在体外和体内模型中验证了该系统的适用性和稳定性。
3.1 NP可在多种衰老模型中准确区分衰老细胞
研究者分别对过氧化氢、依托泊苷和阿霉素诱导衰老的成肌细胞系C2C12和前体脂肪细胞系3T3-L1，进行了多种衰老标志物检测及NMP评分。在NMP系统评分中，衰老细胞呈现出显著的高额负分。作者发现，由NMP打分得出的衰老细胞比例（下图B&C）与衰老标志物X-Gal信号和γH2A信号高度一致，与增殖标志物Ki67的表达呈相反趋势（下图D），并且NMP评分结果与诱导药物表现出显著的剂量依赖性效应。这表明NMP能够稳定、准确地评估这两种细胞在不同诱导因素下的衰老状态。
3.2 NMP准确检测骨骼肌再生和骨关节炎模型中衰老细胞
为验证NMP在体内模型的适用性，研究者对不同年龄段的小鼠注射BaCl₂以诱导肌肉损伤再生。而后通过Sony MA900多功能自动化流式分选仪分离出纤维脂肪源性祖细胞（FAPs）和内皮细胞（ECs），并进行NMP评分和衰老标志物检测。结果显示NMP能够稳定准确地区分出衰老细胞群体，其结果与Ki67（低表达）和γH2A（高表达）的检测结果相符。此外，作者在小鼠关节炎模型中对软骨细胞的衰老状态同样进行了NMP系统评估和衰老标志物检测，也得到了一致的结果。
4.1 高速度、高纯度、高活性的细胞分选
作者利用MA900从小鼠肌肉和软骨组织样本中成功分离了内皮细胞、卫星细胞、纤维脂肪源性祖细胞和软骨细胞等脆弱和稀有细胞亚群。MA900高达50,000 eps的分选速度和超过98%的分选纯度，有力地保障了细胞分选质量。研究中，分选的细胞产物可用于支持后续衰老标志物检测分析，充分体现了其高活性分选能力。
4.2 高效精准的孔板分选
作者通过MA900分选仪将目标细胞直接分选铺入96孔板中进行后续实验。MA900特别设计了7°倾斜角孔板适配器，确保细胞垂直入孔，极大减少撞击孔壁的风险。同时，采用四点定位校准方式，保证整板细胞落点精确，入孔率达到99%以上，高效确保了孔板分选精度和回收效率。
本研究成功开发了极具应用前景的新型衰老细胞鉴定方法NMP，该方法不依赖传统标志物检测，不仅操作更为简单，而且结果变异性低更加稳定，为细胞衰老研究提供了新的视角与工具。在此研究中，Sony MA900凭借其高速度、高纯度、高活性及高精度的孔板分选能力，为研究所涉及的复杂组织样本和脆弱/稀有细胞的分选提供了至关重要的技术保障。
