传统中药在炎性疾病中的应用

心肌肥厚在心脏结构重塑和心力衰竭（heart failure, HF）进展中发挥着重要作用。党参二苓汤（DSELD）是临床用于治疗心力衰竭冠心病的中药方剂。研究人员发现 DSELD 能通过 TLR4 信号通路减轻心力衰竭的炎症损伤来发挥抗心肌肥厚的作用。

研究人员用TMRM（tetramethyl rhodamine methyl ester）和 Alexa Fluor 488 Phalloidin 分别对大鼠心肌细胞系 H9C2 细胞系的线粒体和 F-actin 进行了染色，并用 LPS 处理的 RAW264.7 细胞的 CM（conditioned media）或 CM + DSELD 进行处理。随后用 Molecular Devices 公司的 ImageXpress Micro^® Confocal High-Content Imaging System 对细胞进行成像，并用 MetaXpress^® High-Content Image and Analysis Software 对图像进行分析。结果显示，CM 处理显著提升 H9C2 细胞 F-actin 表达，TMRM 染色显著减少（线粒体去极化），DSELD 处理则显著降低 F-actin 表达并增加 TMRM 染色（图 1）。这说明 DSELD 确实具备降低心肌肥厚及细胞损伤的潜力。

天然产物为药物发现提供灵感，并已被证明是药物发现最有价值的来源。丹参酮 I（Tanshinone I）表现出了抗菌及抗炎效果，但是由于其高亲油性，使其效力低并且成药性质差。另一方面，哌啶是许多 FDA 批准药品中关键的饱和杂环支架。因此，研究人员推测丹参酮I和哌啶形成的支架杂交体是扩展其化学空间及生物空间从而达到治疗效果的潜在策略。经验证丹参酮 I 衍生物确实能抑制 NLRP3 蛋白的降解，阻断 NLRP3 -诱导的凋亡相关斑点状蛋白的寡聚化，从而抑制 NLRP3 炎性小体的活化。

研究人员对小鼠腹膜巨噬细胞进行了固定、穿孔及封闭，并用 ASC 一抗进行了标记，然后用 FITC 结合的二抗进行标记，最后用 Hoechst 33258 进行了核标记。用 ImageXpress^® Micro Confocal High-Content Imaging System 对细胞进行成像，比较对照组，支架杂交体及经典 NLRP3 抑制剂 MCC950 在抑制 ASC 蛋白寡聚化方面的差异（图 2）。结果表明，丹参酮 I 衍生物确实能抑制 NLRP3 炎性小体的活化。

川芎是一种古老的中药，在中国被广泛用于缓解偏头痛，具有令人满意的治疗效果，其中川芎精油是治疗偏头疼的主要生物活性成分。另外，神经炎症是偏头疼的诱因。但是，川芎精油是否有抗神经炎症的活性还不得而知。成都中医药大学 Liang Xiong 课题组通过体外用川芎精油干预 LPS 处理的小鼠小胶质细胞 BV2，结合气相色谱-质谱分析、细胞毒性分析、NO 产生分析、ROS 产生分析、ELISA 检测 IL-6、TNF-α 及 PGE2、WB 等实验发现川芎精油能通过 NF-κB 信号通路显著减少炎症介质和促炎因子的过度产生，从而减轻神经炎症。

本研究中作者用 ImageXpress^® Micro Confocal High-Content Imaging System 对 BV2 细胞进行了成像，并用 MetaXpress 6 软件对平均荧光强度进行了统计以此分析 ROS 的产生。首先，经处理的细胞在 10uM DCFH-DA ，37℃，黑暗环境下处理 20min，之后进行成像。结果表明川芎精油能以剂量依赖的方式显著减少 LPS 处理的 BV2 细胞中 ROS 的产生（图 3）。